Badanie morfologii plemników:

• sporządzenie rozmazów nasienia
• barwienie rozmazów nasienia
• liczenie prawidłowych i zmienionych form plemników

Klasyfikacja zmian morfologicznych plemników wedłóg Bloma:

• wady główne – formy skorelowane z obnizoną płodnością, zmiany plemników, które powstają podczas speramtogenezy i są następstwem procesów patologicznych zachodzących w jądrach
• wady podrzędne – inne zmiany kształtu, które mają ograniczone znaczenie dla płodności samca i prawdopodobnie powstają po wykształceniu się plemnika w jądrze.

Badania morfologii plemników należy przeprowadzać:

• podczas badania przydatności młodego samca do rozpłodu
• przed rozpoczęciem sezony rozpłodowego reproduktora
• okresowo np co 3 miesiące w trakcie eksploatacji reproduktora
• w przypadku stwierdzenia obniżonej płodności reproduktora lub stwierdzeniu niskiej przydatności jego nasienia do konserwacji

BADANIE MORFOLOGII PLEMNIÓW – ocena morfologii plemników polega na określeniu rodzaju anomalii oraz stosunku liczbowego plemników o nieprawidłowej budowie do ogółu plemników w preparacie.

______

BIOTECHNIKI ROZRODU

• – INSEMINACJA
• -EMBRIOTRANSPORT
• -KLONOWANIE

SPOSÓB POBIERANIA NASIENIA

-DO SZTUCZNEJ POCHWY (BUHAJE, TRYKI, OGIERY)

-MANUALNA(KNURY ,PSY)

– ELEKTROAJAKULACJA  (WYJĄTKOWO)

-MASAŻ DODATKOWY GRUCOŁÓW (WYJĄTKOWO)

-PUNKCJA OGONA NADJĄDRZY (WYJĄTKOWO)

– Z NAJĄDRZY (WYJĄTKOWO)

PTAKI

– WYWOŁANE PRZEZ MASAŻ BOCZNY

BIOTECHNOLOGIA ROZRODU- POJĘCIE, OKREŚLAJĄCE SZEREG NENATURALNY METOD ROZRODU SSAKÓW , OPRACOWANYCH Z WYKORZYSTANIEM  OŚIĄGNIĘĆ NAUKOWYCH Z ZAKRESU FIZJOLOGI EMBRIONALNEJ I KARIOBIOLOGI GAMET I ZARODKÓW ORAZ ENDOKRIOKONSERWANCJI. I INNYCH DZIEDZIN NAUKI.

• TECHNIKI STEROWANIA ROZRODEM
• TECHNIKI ZWIĘKSZAJĄCE WYDAJNOŚĆ ROZRODCZĄ SAMIC
• TECHNIKI ZWIĘKSZAJĄCE WYDAJNNOŚC ROZRODCZĄ SAMCÓW
• KRIOKONSERWACJA KOMÓREK PŁCIOWYCH I ZARDOKÓW
• MANIPULACJA NA OOCYTACH I ZARODKACH
• TECHNIKI DIAGNOSTYCZNE W OTECHNOLOGII ROZRODU

KRIOKONSERWANCJA -196ST –PLEMNIK PRZECHOWYWANIE

OCENA POBRANEGO NASIENIA

-PLEMINKÓW

-OSOCZA NASIENIA

– FRAKCJI GALARETOWATEJ

PLEMNIKI Z OOGONÓW NADJĄDRZY ŁĄCZĄ SIĘ Z WYDZIELINAMI DODATKOWYCH GRUCZOŁÓW PŁCIOWYCH O ROŻNYCH WŁAŚCIOWOŚCIACH

OSOCZE NASIENIA:

• ŚRODOWISKO DLA PLEMINIKÓW
• SPEŁNIA ROLĘ TRANSPORTU PLEMNIKÓW
• UAKTYWNIA RUCH PLEMINIKÓW I WPŁYWA NA ICH DALSZE DOJRZEWANIE W MĘSKICH I ŻEŃSKIM UKŁADZIE ROZRODCZYM

SKŁADNIKI OSOCZA

• FRUTOZA
• ERGOTIONEINA
• GLICEROFOSFOCHOLINA

OCENA OBEJMUJE

• OCENA OBJETOŚCI EJAKULATU
• OCENA BARWY NASIENIA
• ZAPACH
• KONSYSTENCJA
• NA OBECNOŚĆ OSADU

KNUR, OGIER- FRAKCJA GALARETOWATA

BUHAJ ,TRYK- CIECZ

OCENA MIKROSKOPOWA- JEST PO KAŻDYM POBRANIU

– OCENA KONCENTRACJI

– RUCHLIWOŚĆ

-STOPIEŃ AGLUTYNACJI

KONCENTRACJA- LICZBA PLEMNIKÓW W 1mm³ NASIENIA           

METODY OZNACZANIA KONCENTRACJI

1. FOTOMETRYCZNA- PRZY UŻYCIU SPEKTROFOTOMETREM STOPIEŃ POCHŁANIA ŚWIATŁA W PORÓWNANIU DO KRZYWEJ INTERPOLACYJNEJ.
2. CYTOMETRYCZNA- NAJDOKŁADNIEJSZA- POLEGA NA POLICZENIU LICZBY PLEMNIKÓW NA STOLIKU ……
3. ASPERMIA – BEZ PLEMNIKÓW

O. OLIGOSPERMIA- NASIENIE BARDZO RZADKIE. MAŁA LICZBA, ODLEGŁOŚĆ 1/3 DŁUGOŚĆ PLEMNIKA LICZBA JEST MNIEJSZA 0,2MLN W 1mm³

R. RARUM?? – NASIENIE RZADKIE 0,2DO 0,7ODLEGŁOŚCI OD PLEMNIKÓW DŁUGOŚCI NITKI

SD. ŚREDNIO GĘSTE -0,7-1MLN W 1mm³ (BUHAJ, TRYK)

D- DENSUM??? – NASIENIE GĘSTE W 1 DO 1,5MM (BUHAJ, TRYK)

DD- DENSISSMUM – TRYK

OCENA RUCHLIOWOŚCI PLEMNIKÓW

1. OCENA RUCHU FALOWEGO MASY PLEMNIKÓW
2. OCENA RUCHU INDYWIDUALNEGO

FALOWANIE 1- BRAK – 6+++++

OCENA RUCHU INDYWIDUALNEGO

1. 1-10%
2. 20-29
3. 40-59
4. 60-79
5. 80-100

RUCH PRAWIDŁOWY

• T- TORPEDOWY
• P- POSTĘPOWY

RUCH NIEPRAWIDŁOWY

• C- KRĄŻĄCY
• R- WSTECZNY
• O-OSCYLUJĄCY

OCENA CASA I SCA

AGLUTYNACJA

-ROŻNA WIELKOŚĆ PLEMINIKÓW

NASTĘPUJĘ WTEDY KIEDY BŁONA ZOSTAJE USZKODZONA

RODZAJE

-POJEDYŃCZA

-GWIEŹDZISTA

BADANIE MORFOLOGII PLEMNIKÓW

OCENA MORFOLOGII PLEMNIKÓW POLEGA NA OKREŚELNIU RODZAJU ANOMALIORAZ STOSUNKU LCZBOWEGO PLEMNIKÓW O NIEPRAWIDŁOWEJ BUDOWIE DOOGÓŁU PLEMNIKÓW W OGLĄDANYM PREPARACIE

BUDOWA PLEMNIKA

-GŁÓWKA

-WTKA (SKŁADA SIĘ Z WŁÓKNA OSIOWEGO)

14-16 RUCHÓW NA SEKUNDĘ

BADANIE MORFOLOGII

KIEDY PRZEPROWADZAMY

• PODCZAS OCENY PRZYDATNOŚCI MŁODEGO SAMA DO ROZPŁODU
• PRZED ROZPOCZĘCIEM SEZONU ROZPŁODOWEGO REPRODUKTORA
• OKRESOWO – NP. CO 3 MESIĄCE W TRAKCJE EKSPLOATACJI ROZPŁODOWEJ REPRODUKTORA
• W PRZYADKU STWIERDZENIA OBNIŻONEJ PŁODNOŚCI REPRODUKTORALUB OBNIŻONEJ PRZYDATNOŚCI JEGO NASIENIA PRZY KONSERWACJI

BARWIENIE EOZYNA (BIAŁE OK) PLEMNIK

KLASYFIKACJA ZMIAN MORFOLOGICZNYCH PLEMNIKÓW BLOMA

– WADY GŁÓWNE-FORMY SKORELOWANE Z OBNIŻONĄ PŁODNŚCIĄ , ZMIANY PLEMNIKÓW KTÓRE POWSTAJĄ W CZASIE SPERMATOGENEZY I SĄ NASTĘPSTWEM PROCESÓWPATOLOGICZNYCH ZACHODZĄCYCH W JĄDRACH

– WADY PODRZĘDNE – PLEMNIKÓW SA TO INNE ZMIANY KSZTAŁTU, KTÓRE MAJA OGRANICZONE ZNACZENIE DLA PŁODNOŚCI SAMCA I PRAWDOPODOBNIE W WIĘKOSZOŚCI PRZYPADKÓW POWSTAJA JUŻ PO WYKSZTAŁCENIU SIĘ PLEMNIKA I OPUSZCZENIU JĄDRA

MORFOLOGICZNE BADANIE PLEMNIKÓW SKLADA SIĘ Z CZYNNOŚCI:

• SPORZĄDZENIE ROZMAZÓW NASIENIA
• BARWIENIE ROZMAZÓW NASIENIA
• LICZENIE PRAWIDŁOWYCH I ZMIENIONYCH FORM PLEMNIKÓW

ZA PRZYDATNE DO UNASIENIA UWAŻA SIĘ TAKIE W KTÓRYCH ODSETEK PLEMNIKÓW Z WADAMI GŁÓWNYMI I PODRZĘDNYMI W SUMIE NIE PRZEKRACZA 25%

KLONOWANIE ZWIERZĄT

KLONOWANIE ZWIERZĄT- ZABIEG BIOTECHNOLOGICZNY PRZEPROWADZONY W CELU UZYSKANIA GRUPY OSOBNIKÓW O IDENTYCZNYM GENTYPIE

ZARODKOWE

SOMATYCZNE

REPRODUKCYJNE                                                         TERAPEUTYCZNE

METODY KLONOWANIA

1. IZOLACJA LASTOMETRÓW ZARODÓW 2-,4-,8- KOMÓRKOWYCH
2. DZIELENIE (BISEKCJA) ZARODKÓW W STADIUM  MORULI LUB BLASTOCYSTY
3. REGENERACJA BLASTOMETRÓW (KLONOWANIE CHIMEROWE)
4. TRANSPLANTACJA JĄDER KOMÓRKOWYCH ZARODKOWYCH DO EKOKLONOWANYCH OOCYTÓW I BLASTROMETRÓW
5. ZAPŁODNIENIA KOMÓRKA JAJOWA (ZYGOTA) PORANA W CZASIE SWOEJEJ WĘDRÓWKI PRZEZ JAJOWÓD PODZIAŁEM- BRUZDKOWANIE

BLASTROMERY- KAŻDY MA POTENCJE ORGANU

F/TOTIPOTENCJA- ZDOLNOŚĆ UTWORZNIA WSZYSTKICH TYPU KOMÓREK POPRZEZ UTWORZENIA CAŁEGO ORGANIZMU

DZIELENIE(BISEKCJA) ZARODKÓW W STADIUM MORULI LUB BLASTOCYSTY

POBRANE W STADIUM MORULI ORAZ WCZESNEJ LUB PÓŻNIEJ BLASTOCYSTY

-PODZIAŁ ZARODKA SZKLANĄ IGŁA

-DZIELI SIĘ PRZY OSŁONCE PRZEJRZYSTEJ

-KIERUNEK W STADIUM MORULI JEST DOWOLONY

• BISEKCJA
• UMIESZCZA SIĘ W PŁYNACH NUE ZMIENIAJĄCYCH PH (NP. P3S Z DODATKIM SUROWICY)
• PO PODZIALE ZARODKI HODOWANE SA IN VITRO PRZEZ 60 MIN I W TYM CZASIE ODZYSKUJĄ PRAWIDLOWY WYGLĄD MORFOLOGICZNY, CZEGO PRZEJAWEM JEST W PRZYPADKU POŁÓWKOWYCH BLASTOCYSTY ICH POMOWNA LIKSPACJA  UTWORZENIE  W OBU Z NICH BLASTOMERU…
• Reagrregacja BLASTOERÓW (KLONOWANIE CHIMEROWE)
• ZWIERZĘTA CHIMEROWE CHARAKTERYZUJĄ SIĘ TYM ŻE MOŻNA MIESZAĆ KOMÓRKI POCHODZĄCE  OD WIĘCEJ NIŻ JEDGO OSOBNIKA
• AGREGACJA DWA LUB WIĘCEJ ZARODKÓW STADIUM PRZEDINPLATYWNEGO??
• INIEKCJA KOMÓREK JEDNEGO ZARODKA DO JAMY?? BLASOCYSTY ZARODKA DRUGIEGO
• MIĘDZYGATUNKOWA CIĄŻA – OBCE GENY DO JAMY BLASTOCYSTY
• TRANSPLANTACJA JĄDER KOMÓRKOWYCH ZARODKOWYCH
• U SSAKÓW KLNÓW LICZĄCYCH WIELE OSOBNIKÓW \. POLEGA ONA NA ZASTĄPIENIUN JĄDRA KOMÓRKI JAJOWEJ JĄDREM POCHODZĄCYM Z KOM STARSZYCH ZRODKÓW NAJCZĘSCIEJ W ZALEŻNOSCI OD GATUNKU 2-32 KLONY

ETAPY TRANSPLANTACJI

• USUWANIE JĄDRA KOMÓRKOWEGO BIORCY (WYJĄDRZANIE-ENIKLEACJA???)
• UZYSKANIE NIE USZKODZONYCH JĄDER KOM , KTÓRE BĘDĄ WPROWADZONE DO WYJĄDRZONEGYCH (ENUKLEOWYCH)KOM BIORCY
• WPRWADZENIE JĄDR KOM DO WYJĄDRZONYCH KOM BIORCÓW
• AKTYWACJA W PRZYPADKU OOCYTÓW, ZREKONSTRUMOWANYCH KOMÓREK BIORCY
• AKTYWACJA REKONSTROWANYCH OOCYTÓW
• PLEMNIK LUB
• PRĄD ELEKTRYCZNY

AGLUTYNACJA – skupiska plemników, które tworzą aglomeraty o różnej wielkości, zjawisko aglutynacji jest następstwem uszkodzenia błon cytoplazmatycznych plemników, w wyniku czego wyciekają enzymy doprowadzające do zlepiania się plemników.

Rodzaje aglutynacji:

• pojedyńcza – plemniki zlepiają sie po dwa
• gwiaździsta – plemniki tworzą większe skupienia

RODZAJE RUCHU INDYWIDUALNEGO PLEMNIKÓW:

RUCH NIEPRAWIDŁOWY:

• KRĄŻĄCY – C
• ZEGAROWY – H
• WSTECZNY – R
• OSCYLUJĄCY – O

RUCH PRAWIDŁOWY:

• TORPEDOWY – T
• POSTĘPOWY – P

OCENA RUCHLIWOŚCI PLEMNIKÓW:

1. Ocena ruchu falowego plemniów
2. Ocena ruchu indywidualnego

Nasienie składa się z :

• plemników
• osocza nasienia
• frakcji galaretowatej

Osocze nasienia:

• stanowi środowisko dla plemniów
• spełnia rolę transportera plemników
• uaktywnia ruch plemników i wpływa na ich dalsze procesy dojrzewania w męskim i żeńskim układzie rozrodczym

Ocena makroskopowa nasienia:

Jest przeprowadzana po każdym pobraniu nasienia

• ocena objętości ejakulatu
• ocena barwy nasienia
• ocena zapachu nasienia
• ocena konsystencji nasienia
• ocena na obecność osadu

Ocena mikroskopowa:

po każdym pobraniu nasienia:

• ocena koncentracji plemników – liczba plemników w 1 mm3 – metoda: fotometryczna (spectrofotometr), cytometryczna (liczenie na stoliku Burkera lub Thoma-Zeissa w rozcięczeniu, metoda standardów ( rozcieczenie 1:30
• ocena ruchliwości plemników
• ocena stopnia aglutynacji plemników